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分子生物学服务

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详细介绍Detailed Introduction

高通量载体点突变服务

背景介绍
        体外点突变技术是指通过PCR等方法向目的DNA片段中增加、删除或突变碱基等。点突变技术是改造、优化基因的便捷手段,是探索启动子调控模式的有效手段,是研究蛋白质结构和功能之间复杂关系的有力工具。
       本公司点突变技术服务使用我司专利MultiMutTM技术进行实验,与常规的突变每次只能突变一个位点不同,MultiMuTM可以一次性对DNA上多个指定位点进行碱基的增加、删除或突变。该技术也可以对多个位点同时进行随机突变,以便研究多个关键位点随机组合后的蛋白功能变化,可以快速的建立多个位点随机突变的突变体库,为体外蛋白进化的研究提供了高效解决方案。

图 我司点突变MultiMutTM技术原理
适用场景
1、消除DNA序列上的特别位点,如酶切位点、甲基化位点等;
2、将密码子进行同义突变或错义突变,研究密码子改变对蛋白翻译效率的影响;
3、研究氨基酸序列改变后对蛋白性能的影响,如研究蛋白磷酸化位点;
4、改变启动子核心元件的序列,研究其对基因转录的影响;
5、研究某些酶的酶学位点等。

优势特点
1、采用我司已被授权的国际PCT专利技术(专利号:US 10,144,936 B2)来进行载体的设计及突变;
2、可以一次性对DNA上多个位点进行碱基的增加、删除或突变;
3、可以多个位点同时进行随机突变;
4、可以与我司转基因服务、检测服务、蛋白服务等衔接,整个实验可以畅通且快速地完成。

实验流程
客户在线下单—订单/实验材料确认—CloneCAD实验设计—突变实验 

实验周期
根据下单时填写的实验信息自动预测

客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照提示填写项目名称、选择项目类型、项目所需要的具体信息,价格由系统自动计算。 

实验信息
在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知,实验过程中客户可以随时登录客户管理系统査看项目实时进展情况。实验结题后,实验报告、检测结果可在线査看,并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁。  

实验交付内容
1、重组载体的全序列信息和注释信息;
2、重组载体的酶切图谱;
3、重组载体的测序结果;
4、重组载体:一份质粒、一份大肠杆菌菌液(25%甘油菌)。

实验案例

图 对1.6kb的gus基因同时进行进行6种类型的突变,a位点为碱基缺失、b位点为碱基缺失和替换、c位点为碱基插入、d位点为多碱基缺失、e位点为多碱基替换、碱基为多碱基插入,实验结果显示一次性全部突变成功。突变后的片段克隆至载体后转化大肠杆菌,进行菌液PCR鉴定,结果显示约75%的为菌斑预期重组子,随机取6个克隆进行测序,结果显示每个克隆的6个点全部实现了正确突变,突变成功率100%。



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