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分子生物学服务

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详细介绍Detailed Introduction

 RACE技术服务

背景介绍
       cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)是一种根据部分cDNA序列基于RCR方法获取完整cDNA全长的技术。与常规PCR相比,RACE仅使用一种特异性PCR引物和第二种非特异性引物,根据需要扩增的区域在cDNA的3’端或5’端来选择第二种引物结合polyA尾巴(3’RACE)还是结合在转录本上(5’RACE)。cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)是一种根据部分cDNA序列基于RCR方法获取完整cDNA全长的技术。与常规PCR相比,RACE仅使用一种特异性PCR引物和第二种非特异性引物,根据需要扩增的区域在cDNA的3’端或5’端来选择第二种引物结合polyA尾巴(3’RACE)还是结合在转录本上(5’RACE)。
 
图 3’RACE原理图。利用mRNA 3’末端的polyA尾巴作为一个引物结合位点,以Oligo(dT)作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA,然后用一个基因特异引物作为上游引物,用一个含有部分接头序列的通用引物作为下游引物,以cDNA第一链为模板,进行PCR循环,把3’末端的cDNA片段扩增出来。

图 5’RACE原理图。利用一条基因特异性反转录引物,在反转录酶的作用下合成cDNA第一链,将RNA-DNA杂合链中的RNA降解纯化后,利用末端转移酶在cDNA链的3’端加入polyC尾巴,然后利用锚定引物和一条基因特异性引物扩增。
适用场景
获得未知基因完整的3’端或5’端cDNA序列,找到完整的开放阅读框(ORF)。

优势特点
1、拥有丰富的设计简并性引物的实验经验;
2、可以与我司载体构建服务、转基因服务、检测服务、蛋白服务等衔接,整个实验可以畅通且快速地完成。

实验流程
客户在线下单—订单信息/实验材料确认—引物设计—PCR扩增—测序分析—获得完整的ORF阅读框

实验周期
根据下单时填写的实验信息自动预测

客户下单及项目信息填写:
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照提示填写项目名称、选择项目类型、项目所需要的具体信息,价格由系统自动计算。

实验信息
在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知,实验过程中客户可以随时登录客户管理系统査看项目实时进展情况。实验结题后,实验报告、检测结果可在线査看,并永久保留。

实验交付内容
1、实验报告:引物信息、实验过程、PCR产物凝胶图片、完整的ORF序列;
2、测序结果:实验相关的全部测序文件。



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