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分子生物学试剂

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详细介绍Detailed Introduction

BioRun DpnI使用说明书
货号:#RCB00
酶浓度:10U/µL
规格:200U/1000U/5000U

产品介绍
BioRun DpnI识别并酶切DNA双链中腺嘌呤N6位甲基化(N6-methyladenine)的GATC序列。BioRun DpnI识别位点中两个腺嘌呤的N6位都甲基化时,呈现正常的酶活力;只有一个腺嘌呤的N6位甲基化时,酶切活力会降低约60倍。
从dam+(Dam甲基化酶表达阳性)大肠杆菌菌株如DH5α等提取的质粒的GATC序列中腺嘌呤N6位被甲基化,从而可以被BioRun DpnI识别和酶切;而从dam-(Dam甲基化酶表达阴性)大肠杆菌菌株如JM110等提取的质粒的GATC序列中腺嘌呤N6位没有被甲基化,从而不能被BioRun DpnI识别和酶切。

产品组分


酶切识别位点


用途
去除PCR产物中的背景质粒,降低同源重组克隆的假阳性率。

使用方法
直接在PCR产物中加BioRun DpnI,每50 µL PCR产物添加1 µL的BioRun DpnI。37℃处理15~30分钟,再80℃失活20分钟。若酶切连接反应或者重组体系全为PCR片段,则无需失活直接反应。

运输与保存
低温运输,-20℃保存,有效期1年。



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