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分子生物学试剂

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详细介绍Detailed Introduction

Golden Gate克隆系列酶
Golden Gate原理
       Golden Gate克隆技术依赖于1996年首次发现的IIS型限制酶,IIS型限制酶和传统的限制酶不同,其切割位点和识别位点不同,会在识别序列外切割岀4个碱基的粘性末端,在目的基因切割位点外设计IIS型限制酶识别位点,酶切连接后该识别位点被消除,不会岀现在最后的载体中;载体上含有与目的基因的切割位点互补的突出末端,可以指导连接。

Golden Gate原理图

注:可在单一管内同时进行酶切和连接反应,不需要进行DNA纯化回收,我司研发人员曾试过只用15min就完成酶切、连接反应,配合我司的载体,克隆阳性率可达到99.9%。

产品类别

TypeIIS限制性内切酶

 

T4 DNA连接酶

BioRun BsmBI

价格:咨询有惊喜哟
说明书:点击下载

产品描述
本产品为快速内切酶,可在5~15min内完成反应。同裂酶为:Esp3I。

产品组分

酶切位点

反应温度
55℃

失活条件
80℃温育20min

甲基化影响
受CpG甲基化影响,序列完全重叠,剪切阻断,同时受EcoBI甲基化影响,序列可能重叠,剪切可能受影响。
 

BioRun Eco31I

价格:咨询有惊喜哟
说明书:点击下载

产品描述
本产品为快速内切酶,可在5~15min内完成反应。同裂酶为:BsaI。

产品组分


酶切位点
 

反应温度
37℃

失活条件
65℃温育20min

甲基化影响
受CpG甲基化影响,序列完全重叠,剪切阻断,受dcm甲基化影响,序列可能重叠,剪切可能受影响。
 

BioRun BbsI
产品描述
Type IIS型限制性内切酶,快速酶,适用于Golden Gate克隆。同裂酶为BpiⅠ、BbvⅡ、BstV21。

产品组分

酶切位点

反应温度
37℃

失活条件
65℃温育20min

甲基化影响
CpG甲基化不敏感,dam甲基化不敏感,dcm甲基化不敏感。

 
T4 DNA Ligase
产品描述
       T4 DNA Ligase可催化dsDNA平末端或粘性末端相邻核苷酸的5’磷酸末端和3’羟基末端形成磷酸二酯键,还可以催化RNA和双链中的ssDNA或RNA链连接,但不能催化全单链核苷酸连接。适用于标记RNA 3’-末端,环化RNA和DNA寡聚核苷酸以及克隆cDNA等核酸操作。

产品组分

反应条件
16℃过夜连接
 


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