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分子生物学试剂

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详细介绍Detailed Introduction

普通PCR Mix系列
PCR法的原理
       PCR实验操作原理:将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃~94℃使其变性解成单链;人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72°C将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’-3’方向延伸,合成DNA的新互补链。

PCR法原理图

产品类别

选购指南

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PCR法的原理
        2×BioRun Taq PCR Mix包含DNA聚合酶、dNTPs和反应缓冲液,仅需要加入DNA模板和引物即可直接进行PCR扩增。该Mix中的Taq聚合酶为蛋白质工程改造酶,与野生酶相比,具有更快的扩增速率和更强的扩增能力,尤其是该Mix增强了对动植物组织、细菌等生物体组分抑制剂的忍耐能力,适用于动植物组织碱裂解物、细菌的直接PCR鉴定,常用于基因敲除/敲入鉴定、目标基因鉴定、TA克隆等实验。

产品特点
1、扩增速率快,2-3kb/min,节省检测时间;
2、抑制剂耐受能力强,动、植物组织碱裂解物无需中和,直接扩增;
3、适用范围广,可用于动物细胞、植物组织、细菌、真菌目标基因的鉴定;
4、成功率高,高AT、高GC、低丰度模板均能得到良好扩增。

产品组分

扩增实例
1、以水稻叶片碱裂解物(无需中和)为模板,扩增不同稻苗转基因项目靶标基因,30个循环。

2、以农杆菌为模板,扩增潮霉素抗性基因片段,26个循环。



2×BioRun Pfu PCR Mix

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产品描述
       2×BioRun Pfu PCR Mix是一种即用型的高保真PCR Mix,仅需要加入DNA模板和引物即可进行PCR扩增。2×BioRun Pfu PCR Mix中的DNA聚合酶经过蛋白质工程技术改造,具有优秀的持续合成能力和保真性,适合较长片段的高保真扩增,该聚合酶的保真性是野生型Pfu DNA聚合酶的2倍,扩增速率是野生型的4-8倍,最大扩增长度是野生型的8-10倍。Mix还添加了延伸促进辅酶和产物抑制辅酶,使其在长片段扩增、高产量方面有极大提高。经过严格质控,2×BioRun Pfu PCR Mix无非特异性核酸酶活性残留,无宿主基因组DNA残留,适用于实验室常规克隆及高保真克隆。

产品特点
1、超高保真性,连续扩增12kb质粒DNA无差错;
2、长片段扩增,可扩增20kb的质粒/病毒DNA片段;
3、扩增产物产量高;
4、提供引物设计工具与Tm值计算工具。

产品组分

扩增实例
1、2×BioRun Pfu PCR Mix扩增pET-30a(+)载体(约5kb),26个循环。

 

2、2×BioRun Pfu PCR Mix从水稻基因组DNA上扩增1.3kb启动子片段,30个循环。

3、2×BioRun Pfu PCR Mix用于多片段一次性组装克隆(配合2×BioRun Seamless Cloning Kit),30个循环。

4、2×BioRun Pfu PCR Mix连续扩增12kb质粒DNA的碱基错误率。



2×BioRun KOD1 PCR Mix
产品描述
       2×BioRun KOD1 PCR Mix中含有DNA聚合酶、dNTPs和反应缓冲液,仅需要加入DNA模板和引物即可直接进行PCR扩增。2×BioRun KOD1 PCR Mix中的DNA聚合酶经过蛋白质工程技术改造,具有优秀的持续合成能力和保真性,适合较长片段的高保真扩增,该聚合酶的保真性略低于Pfu DNA聚合酶,扩增速率是野生型Pfu的4-8倍,最大扩增长度是野生型Pfu的8-10倍。Mix还添加了延伸促进辅酶和产物抑制辅酶,使其在长片段扩增、高产量方面有极大提高。该酶适用于实验室常规克隆及检测。

产品特点
1、扩增速率快,4-5kb/min;
2、长片段扩增,可扩增10kb以上的DNA片段;
3、扩增效率高,低模板量、低循环数即可得到较高产量。

产品组分
应用实例
2×KOD1 PCR Mix扩增水稻和拟南芥基因组(约5kb),25个循环。

注意事项
1、推荐使用SnapGene软件计算退火温度,扩增片段亮度不高时,适当降低退火温度(降低0-5℃);
2、使用菌体、动植物组织做模板时,应适当增加预变性时间。


2×BioRun Magic PCR Mix
产品描述
       2×BioRun Magic PCR Mix中含有DNA聚合酶、dNTPs和反应缓冲液,仅需要加入DNA模板和引物即可直接进行PCR扩增。该Mix中的聚合酶为蛋白质工程改造酶,具有极强的扩增能力和较高的扩增速率,适用于长片段菌落PCR鉴定、敲除/敲入基因鉴定等实验

产品特点
1、扩增速率快,4-5kb/min;
2、长片段扩增,可扩增10kb以上的DNA片段;
3、扩增效率高,低模板量、低循环数即可得到较高产量。

产品组分

应用实例
2×BioRun Magic PCR Mix扩增拟南芥和水稻基因组(约5kb),25个循环。

注意事项
1、推荐使用SnapGene软件计算退火温度,扩增片段亮度不高时,适当降低退火温度(降低0-5℃);
2、使用菌体、动植物组织做模板时,应适当增加预变性时间;
3、进行高保真克隆时,推荐使用我司2×BioRun Pfu PCR Mix(Cat:RAC00)。


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